נהלי סטנדרטיזציה ומפרטי קבלה של חדר סטרילי

1. מטרה: נוהל זה נועד לספק נוהל סטנדרטי לפעולות אספטיות והגנה על חדרים סטריליים.

2. היקף היישום: מעבדת בדיקות ביולוגיות

3. אדם אחראי: בודק מפקח QC

4. הגדרה: אין

5. אמצעי זהירות

בצע בקפדנות פעולות אספטיות כדי למנוע זיהום מיקרוביאלי;מפעילים צריכים לכבות את מנורת ה-UV לפני הכניסה לחדר סטרילי.

6. נהלים

6.1.יש להצטייד בחדר סטרילי בחדר ניתוח סטרילי ובחדר חיץ.הניקיון של חדר הניתוח הסטרילי צריך להגיע לדרגה 10000. יש לשמור על הטמפרטורה הפנימית של 20-24 מעלות צלזיוס ולחות ב-45-60%.ניקיון הספסל הנקי אמור להגיע לדרגה 100.

6.2.יש לשמור על ניקיון חדר סטרילי, ואסור בתכלית האיסור להעלות פסולת כדי למנוע זיהום.

6.3.מנע בקפדנות זיהום של כל ציוד העיקור ואמצעי התרבית.אלה שמזוהמים צריכים להפסיק להשתמש בהם.

6.4.חדר סטרילי צריך להיות מצויד בחומרי חיטוי בריכוז עבודה, כגון תמיסת קרסול 5%, אלכוהול 70%, תמיסת כלורמתיונין 0.1% וכו'.

6.5.יש לעקר באופן קבוע את החדר הסטרילי ולנקות אותו בחומר חיטוי מתאים על מנת להבטיח שניקיון החדר הסטרילי עומד בדרישות.

6.6.כל המכשירים, הכלים, הכלים ופריטים אחרים שצריך להכניס לחדר סטרילי צריכים להיות עטופים היטב ומעקרים בשיטות מתאימות.

6.7.לפני הכניסה לחדר סטרילי, הצוות חייב לשטוף את ידיו בסבון או בחומר חיטוי, ולאחר מכן להחליף לבגדי עבודה מיוחדים, נעליים, כובעים, מסכות וכפפות בחדר חיץ (או לנגב את הידיים שוב עם 70% אתנול) לפני הכניסה לחדר סטרילי.בצע פעולות בתא חיידקים.

6.8.לפני השימוש בחדר סטרילי, יש להדליק את מנורת האולטרה סגול בחדר סטרילי לצורך הקרנה ועיקור למשך יותר מ-30 דקות, ויש להפעיל את הספסל הנקי לצורך ניפוח אוויר בו-זמנית.לאחר השלמת הפעולה, יש לנקות את החדר הסטרילי בזמן ולאחר מכן לעקר אותו באור אולטרה סגול למשך 20 דקות.

6.9.לפני הבדיקה, יש לשמור על האריזה החיצונית של דגימת הבדיקה שלמה ואסור לפתוח אותה כדי למנוע זיהום.לפני הבדיקה, השתמש בכדורי צמר גפן 70% אלכוהול כדי לחטא את המשטח החיצוני.

6.10.במהלך כל פעולה יש לבצע בקרה שלילית לבדיקת מהימנות הפעולה האספטית.

6.11.בעת ספיגת נוזל חיידקים, יש להשתמש בכדור יניקה לספיגתו.אל תיגע בקשית ישירות עם הפה.

6.12.יש לעקר את מחט החיסון על ידי להבה לפני ואחרי כל שימוש.לאחר הקירור, ניתן לחסן את התרבית.

6.13.יש להשרות את הקשיות, המבחנות, צלחות הפטרי וכלים האחרים המכילים נוזל חיידקי בדלי עיקור המכיל תמיסת ליסול 5% לחיטוי, ולהוציא ולשטוף לאחר 24 שעות.

6.14.אם נשפך נוזל חיידקי על השולחן או הרצפה, יש לשפוך מיד תמיסת חומצה קרבולית 5% או 3% ליסול על האזור המזוהם לפחות 30 דקות לפני הטיפול בו.כאשר בגדי עבודה וכובעים מזוהמים בנוזל חיידקים, יש להסירם מיד ולשטוף אותם לאחר עיקור בלחץ גבוה בקיטור.

6.15.יש לחטא את כל הפריטים המכילים חיידקים חיים לפני שטיפה מתחת לברז.חל איסור מוחלט לזהם את הביוב.

6.16.יש לבדוק את מספר המושבות בחדר סטרילי מדי חודש.כשהספסל הנקי פתוח, קח מספר צלחות פטרי סטריליות בקוטר פנימי של 90 מ"מ, והזריקו באופן אספטי כ-15 מ"ל של מצע תרבית אגר מזין שהומס וקירר לכ-45 מעלות צלזיוס.לאחר התמצקות, הנח אותו הפוך ב-30 עד 35 דגירה במשך 48 שעות באינקובטור של ℃.לאחר הוכחת סטריליות, קח 3 עד 5 צלחות והנח אותן בצד שמאל, באמצע וימין של עמדת העבודה.לאחר פתיחת המכסה וחשיפתם למשך 30 דקות, הניחו אותם הפוכים באינקובטור של 30 עד 35 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות והוציאו אותם.לִבחוֹן.המספר הממוצע של חיידקים שונים בצלחת בשטח נקי מסוג 100 לא יעלה על מושבה אחת, והמספר הממוצע בחדר נקי מסוג 10000 לא יעלה על 3 מושבות.אם חריגה מהמגבלה, יש לחטא ביסודיות את החדר הסטרילי עד שבדיקות חוזרות יעמדו בדרישות.

7. עיין בפרק (שיטת בדיקת סטריליות) ב"שיטות בדיקה היגיינית של תרופות" ו"נהלי הפעלה סטנדרטיים בסין לבדיקת סמים".

8. מחלקת הפצה: מחלקת ניהול איכות

הנחיות טכניות לחדר נקי:

לאחר קבלת סביבה סטרילית וחומרים סטריליים, עלינו לשמור על מצב סטרילי על מנת לחקור מיקרואורגניזם ידוע ספציפי או לנצל את הפונקציות שלהם.אחרת, מיקרואורגניזמים שונים מבחוץ יכולים להתערבב בקלות. התופעה של ערבוב של מיקרואורגניזמים לא רלוונטיים מבחוץ נקראת במיקרוביולוגיה חיידקים מזהמים.מניעת זיהום היא טכניקה קריטית בעבודה מיקרוביולוגית.עיקור מלא מצד אחד ומניעת זיהום מצד שני הם שני היבטים של טכניקה אספטית.בנוסף, עלינו למנוע מהמיקרואורגניזמים הנבדקים, במיוחד מיקרואורגניזמים פתוגניים או מיקרואורגניזמים מהונדסים גנטית שאינם קיימים בטבע, לברוח ממיכלי הניסוי שלנו אל הסביבה החיצונית.למטרות אלה, במיקרוביולוגיה, ישנם אמצעים רבים.

חדר סטרילי הוא בדרך כלל חדר קטן שהוקם במיוחד במעבדה למיקרוביולוגיה.ניתן לבנות עם יריעות וזכוכית.השטח לא צריך להיות גדול מדי, כ-4-5 מ"ר, והגובה צריך להיות כ-2.5 מטרים.יש להקים חדר חיץ מחוץ לחדר סטרילי.הדלת של חדר החיץ ודלת החדר הסטרילי לא אמורות לפנות לאותו כיוון כדי למנוע מזרימת האוויר להכניס חיידקים שונים.גם חדר סטרילי וגם חדר חיץ חייבים להיות אטומים.ציוד אוורור פנימי חייב להיות בעל התקני סינון אוויר.הרצפה והקירות של החדר הסטרילי חייבים להיות חלקים, קשה להכיל לכלוך וקלים לניקוי.משטח העבודה צריך להיות ישר.גם חדר סטרילי וגם חדר חיץ מצוידים בנורות אולטרה סגולות.האורות האולטרה סגולים בחדר סטרילי נמצאים במרחק של מטר אחד ממשטח העבודה.צוות הנכנס לחדר סטרילי צריך ללבוש בגדים וכובעים מעוקרים.

כיום, חדרים סטריליים קיימים בעיקר במפעלי מיקרוביולוגיה, בעוד שמעבדות כלליות משתמשות בספסל נקי.התפקיד העיקרי של הספסל הנקי הוא להשתמש בהתקן זרימת אוויר למינרית כדי להסיר אבק זעיר שונים כולל מיקרואורגניזמים על משטח העבודה.המכשיר החשמלי מאפשר לאוויר לעבור דרך מסנן hepa ואז להיכנס למשטח העבודה, כך שמשטח העבודה נשמר תמיד תחת שליטה של ​​אוויר סטרילי זורם.יתרה מכך, ישנו מסך אוויר מהיר בצד הקרוב לבחוץ למניעת כניסת אוויר חיידקי חיצוני.

במקומות עם תנאים קשים, ניתן להשתמש גם בקופסאות עץ סטריליות במקום ספסל נקי.לקופסה הסטרילית מבנה פשוט וקל להזזה.ישנם שני חורים בחזית הקופסה, אשר חסומים על ידי דלתות דחיפה כאשר אינן בפעולה.אתה יכול להושיט את הידיים פנימה במהלך הניתוח.החלק העליון של החזית מצויד בזכוכית כדי להקל על הפעולה הפנימית.יש מנורת אולטרה סגול בתוך הקופסה, וניתן להכניס כלים וחיידקים דרך דלת קטנה בצד.

טכניקות הפעלה אספטיות כיום לא רק ממלאות תפקיד מרכזי במחקר ויישומים מיקרוביולוגיים, אלא גם נמצאות בשימוש נרחב בביוטכנולוגיות רבות.למשל, טכנולוגיה מהונדסת, טכנולוגיית נוגדנים חד שבטיים וכו'.