נהלי סטנדרטיזציה של חדר סטרילי ומפרטי קבלה

1. מטרה: נוהל זה נועד לספק נוהל סטנדרטי לפעולות אספטיות והגנה על חדרים סטריליים.

2. היקף היישום: מעבדת בדיקות ביולוגיות

3. אדם אחראי: בוחן המפקח על QC

4. הגדרה: אין

5. אמצעי בטיחות

לבצע בקפדנות פעולות אספטיות למניעת זיהום מיקרוביאלי; על המפעילים לכבות מנורת UV לפני שנכנסים לחדר סטרילי.

6. תמציות

6.1. החדר הסטרילי צריך להיות מצויד בחדר פעולה סטרילי ובחדר חיץ. הניקיון של חדר ההפעלה הסטרילי אמור להגיע לכיתה 10000. יש לשמור על הטמפרטורה המקורה בטמפרטורה של 20-24 מעלות צלזיוס ויש לשמור על הלחות על 45-60%. הניקיון של הספסל הנקי צריך להגיע לכיתה 100.

6.2. יש לשמור על חדר סטרילי נקי, ואסור בקפדנות לערום פסולת כדי למנוע זיהום.

6.3. למנוע בקפדנות זיהום של כל ציוד העיקור ותקשורת התרבות. אלה המזוהמים צריכים להפסיק להשתמש בהם.

6.4. יש להצטייד בחדר סטרילי בחומרי חיטוי ריכוז עובדים, כמו תמיסת קרזול של 5%, 70% אלכוהול, 0.1% תמיסת כלורמתונין וכו '.

6.5. יש לעקר את החדר הסטרילי ולנקות אותו באופן קבוע עם חומר חיטוי מתאים כדי להבטיח כי הניקיון של החדר הסטרילי עומד בדרישות.

6.6. כל המכשירים, המכשירים, הכלים והפריטים האחרים שצריכים להכניס לחדר סטרילי צריכים להיות עטופים בחוזקה ולמעוקרים בשיטות מתאימות.

6.7. לפני שנכנסים לחדר סטרילי, על הצוות לשטוף ידיים בסבון או בחומר חיטוי, ואז להחליף לבגדי עבודה מיוחדים, נעליים, כובעים, מסכות וכפפות בחדר חיץ (או לנגב שוב את הידיים עם 70% אתנול) לפני שנכנסים לחדר סטרילי. בצע פעולות בתא החיידקים.

6.8. לפני השימוש בחדר סטרילי, יש להפעיל את המנורה האולטרה סגולה בחדר סטרילי לצורך הקרנה ועיקור במשך יותר מ -30 דקות, ויש להפעיל את הספסל הנקי לצורך נושף אוויר בו זמנית. לאחר סיום הניתוח, יש לנקות את החדר הסטרילי בזמן ואז לעקר על ידי אור אולטרה סגול למשך 20 דקות.

6.9. לפני הבדיקה, יש לשמור על האריזה החיצונית של דגימת הבדיקה על כנה ואסור לפתוח אותה כדי למנוע זיהום. לפני הבדיקה, השתמש בכדורי כותנה אלכוהול של 70% כדי לחטא את המשטח החיצוני.

6.10. במהלך כל פעולה יש לבצע בקרה שלילית כדי לבדוק את האמינות של פעולה אספטית.

6.11. כשאתה סופג נוזל חיידקי, עליך להשתמש בכדור יניקה כדי לספוג אותו. אל תיגע בקש ישירות בפה.

6.12. יש לעקר את מחט החיסון על ידי להבה לפני ואחרי כל שימוש. לאחר הקירור ניתן לחסוך את התרבות.

6.13. יש להשרות את הקשיות, צינורות הבדיקה, מנות פטרי וכלי כלים אחרים המכילים נוזל חיידקי בדלי עיקור המכיל תמיסת ליזול של 5% לחיטוי, ולהוציא ולשטוף לאחר 24 שעות.

6.14. אם יש נוזל חיידקי שנשפך על השולחן או הרצפה, עליך לשפוך מיד 5% תמיסת חומצה קרבולית או 3% ליזול על האזור המזוהם למשך 30 דקות לפחות לפני הטיפול בו. כאשר בגדי עבודה וכובעים מזוהמים בנוזל חיידקים, יש להוריד אותם מייד ולשטוף אותם לאחר עיקור קיטור בלחץ גבוה.

6.15. יש לחטא את כל הפריטים המכילים חיידקים חיים לפני שהם נשטפים מתחת לברז. אסור בקפדנות לזהם את הביוב.

6.16. יש לבדוק את מספר המושבות בחדר סטרילי מדי חודש. כאשר הספסל הנקי פתוח, קח מספר מנות פטרי סטריליות בקוטר פנימי של 90 מ"מ, והזריק באופן אספטי בערך 15 מ"ל של מדיום תרבית אגר מזין שנמס והתקרר לכ- 45 מעלות צלזיוס. לאחר ההתמצקות, הניחו אותו הפוך על 30 עד 35 דגירה למשך 48 שעות בחממה ℃. לאחר הוכחת סטריליות, קח 3 עד 5 צלחות והניח אותן בצד שמאל, אמצע וימין של עמדת העבודה. לאחר פתיחת הכיסוי וחשיפתם למשך 30 דקות, הניחו אותם הפוכים בחממה של 30 עד 35 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות והוציאו אותם החוצה. לִבחוֹן. המספר הממוצע של חיידקים שונים בצלחת באזור נקי של מחלקה 100 לא יעלה על מושבה אחת, והמספר הממוצע בחדר נקי של 10000 לא יעלה על 3 מושבות. אם חורגת מהגבול, יש לחטא את החדר הסטרילי ביסודיות עד לבדיקות חוזרות ונשנות לעמוד בדרישות.

7. עיין בפרק (שיטת בדיקת סטריליות) ב"שיטות בדיקה היגייניות של תרופות "ו"פרקטיקות הפעלה סטנדרטיות בסין לבדיקת תרופות".

8. מחלקת הפצה: מחלקת ניהול איכות

הנחיות טכניות בחדר נקי:

לאחר השגת סביבה סטרילית וחומרים סטריליים, עלינו לשמור על מצב סטרילי על מנת ללמוד מיקרואורגניזם ידוע ספציפי או לנצל את תפקידיהם. אחרת, מיקרואורגניזמים שונים מבחוץ יכולים להתערבב בקלות. התופעה של ערבוב מיקרואורגניזמים לא רלוונטיים מבחוץ נקראת חיידקים מזוהמים במיקרוביולוגיה. מניעת זיהום היא טכניקה קריטית בעבודה מיקרוביולוגית. עיקור מלא מצד אחד ומניעת זיהום מאידך שני היבטים של טכניקה אספטית. בנוסף, עלינו למנוע את המיקרואורגניזמים הנחקרים, במיוחד מיקרואורגניזמים פתוגניים או מיקרואורגניזמים מהונדסים גנטית שאינם קיימים בטבע, מלהימלט ממכולות הניסוי שלנו לסביבה חיצונית. למטרות אלה, במיקרוביולוגיה, ישנם מדדים רבים.

חדר סטרילי הוא בדרך כלל חדר קטן שהוקם במיוחד במעבדת המיקרוביולוגיה. ניתן לבנות עם סדינים וזכוכית. האזור לא אמור להיות גדול מדי, כ -4-5 מ"ר, והגובה צריך להיות בערך 2.5 מטר. יש להקים חדר חיץ מחוץ לחדר סטרילי. דלת חדר החיץ ודלת החדר הסטרילי לא אמורים להתמודד עם אותו כיוון כדי למנוע זרימת אוויר להכניס חיידקים שונים. גם חדר סטרילי וגם חדר חיץ חייבים להיות אטומים. ציוד אוורור מקורה חייב להיות בעל מכשירי סינון אוויר. הרצפה והקירות של החדר הסטרילי חייבים להיות חלקים, קשים ללכלוך וקל לניקוי. משטח העבודה צריך להיות ברמה. גם החדר הסטרילי וגם חדר החיץ מצוידים באורות אולטרה סגול. האורות האולטרה סגולים בחדר סטרילי נמצאים במרחק מטר משטח העבודה. צוות שנכנס לחדר סטרילי צריך ללבוש בגדים מעוקרים וכובעים.

נכון לעכשיו, חדרים סטריליים קיימים לרוב במפעלי מיקרוביולוגיה, ואילו מעבדות כלליות משתמשות בספסל נקי. התפקיד העיקרי של הספסל הנקי הוא להשתמש במכשיר זרימת אוויר למינרית כדי להסיר אבק זעיר שונים כולל מיקרואורגניזמים על משטח העבודה. המכשיר החשמלי מאפשר לאוויר לעבור דרך פילטר HEPA ואז להיכנס למשטח העבודה, כך שמשטח העבודה נשמר תמיד בשליטת אוויר סטרילי זורם. יתר על כן, יש וילון אוויר במהירות גבוהה בצד קרוב לחוץ כדי למנוע כניסה של אוויר חיידקי חיצוני.

במקומות עם תנאים קשים, ניתן להשתמש גם בתיבות סטריליות מעץ במקום ספסל נקי. לקופסה הסטרילית יש מבנה פשוט וקל להזיז. ישנם שני חורים בקדמת הקופסה, שנחסמים על ידי דלתות דחיפה כשלא בפעולה. אתה יכול להרחיב את הידיים שלך במהלך הפעולה. החלק העליון של החזית מצויד בזכוכית כדי להקל על הפעולה הפנימית. יש מנורה אולטרה סגולה בתוך קופסה, וניתן להכניס כלים וחיידקים דרך דלת קטנה בצד.

טכניקות הפעלה אספטיות כיום לא רק ממלאות תפקיד מרכזי במחקר וביישומים מיקרוביולוגיים, אלא נמצאים בשימוש נרחב גם בביוטכנולוגיות רבות. לדוגמה, טכנולוגיה טרנסגנית, טכנולוגיית נוגדנים מונוקלונליים וכו '.